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Comparison of three methodologies of isolation, purification and in vitro culture of murine T lymphocytes

Comparación de tres metodologías de aislamiento, purificación y cultivo in vitro de linfocitos T murinos

dc.creatorChaves-Rodríguez, María I
dc.creatorMorales-Sánchez, Johan E.
dc.creatorMata-Rojas, Nazareth
dc.creatorCalvo-Castro, Laura A.
dc.creatorHernández-Carvajal, Erick
dc.creatorLoaiza-Montoya, Randall
dc.date2019-05-16
dc.date.accessioned2020-09-25T23:12:26Z
dc.date.available2020-09-25T23:12:26Z
dc.identifierhttps://revistas.tec.ac.cr/index.php/tec_marcha/article/view/4352
dc.identifier10.18845/tm.v32i2.4352
dc.identifier.urihttps://hdl.handle.net/2238/11942
dc.descriptionThe isolation and selection of pure T lymphocytes from spleen primary culture can be obtained easily and quickly using commercial kits that use magnetics microbeads to capture and purify the cells. Despite these advantages, the financial burden that the constant acquisition of these kits can impose to a laboratory budget makes it important to evaluate other options. We compared the cell recovery, viability and purity percentage of three isolation and purification methods; two of them of low cost and easy implementation (cell adhesion of cultures treated with Ammonium-Chloride-Potassium (ACK) buffer, and Ficoll), and a commercial with kit of negative selection with magnetics microbeads. With the ACK-cell adhesion method, we found a recovery and purity percentage of lymphocytes T comparable to the one obtained with the kit. Although this method requires more time, as cells must be incubated overnight, it is easily implemented and has a comparable efficiency to the kit, as well as a lower cost. This method can be taken into account for experiments that can use activated cells.en-US
dc.descriptionEl aislamiento y selección de linfocitos T puros de cultivo primario de bazo de ratón puede obtenerse de manera rápida y fácil utilizando kits comerciales con microesferas magnéticas para capturar y purificar las células. A pesar de estas ventajas, la carga financiera que puede representar para el presupuesto de un laboratorio, la adquisición constante de estos kits justifica la evaluación de otras opciones de menor costo. Por ello, se comparó el porcentaje de recuperación celular, viabilidad y pureza de tres métodos de aislamiento y purificación de linfocitos T; dos de bajo costo y fácil implementación (aislamiento con amortiguador de amonio- cloruro-potasio (ACK)-adhesión celular y aislamiento con Ficoll), y un kit comercial de selección negativa con microesferas magnéticas. Con el método de amortiguador ACK-adhesión celular se obtuvo un porcentaje de recuperación y purificación de linfocitos T viables comparable al obtenido con el kit. Aunque este método requiere más tiempo, dado que las células deben ser incubadas durante toda la noche, es de fácil implementación y tiene una eficiencia comparable al kit, así como un menor costo. Este método puede ser tomado en cuenta para utilizar en experimentos que puedan trabajar con linfocitos activados.es-ES
dc.formatapplication/pdf
dc.formattext/html
dc.languagespa
dc.publisherEditorial Tecnológica de Costa Rica (entidad editora)es-ES
dc.relationhttps://revistas.tec.ac.cr/index.php/tec_marcha/article/view/4352/3943
dc.relationhttps://revistas.tec.ac.cr/index.php/tec_marcha/article/view/4352/3944
dc.sourceTecnología en marcha Journal; 2019: Vol. 32, Núm. 2: Abril-Junio 2019; Pág. 91-99en-US
dc.sourceRevista Tecnología en Marcha; 2019: Vol. 32, Núm. 2: Abril-Junio 2019; Pág. 91-99es-ES
dc.source2215-3241
dc.source0379-3982
dc.subjectCD3en-US
dc.subjectACK bufferen-US
dc.subjectcellular adherenceen-US
dc.subjectFicollen-US
dc.subjectmagnetic microbeadsen-US
dc.subjectCD3es-ES
dc.subjectamortiguador ACKes-ES
dc.subjectadherencia celulares-ES
dc.subjectFicolles-ES
dc.subjectmicroesferas magnéticases-ES
dc.titleComparison of three methodologies of isolation, purification and in vitro culture of murine T lymphocytesen-US
dc.titleComparación de tres metodologías de aislamiento, purificación y cultivo in vitro de linfocitos T murinoses-ES
dc.typeinfo:eu-repo/semantics/article
dc.typeinfo:eu-repo/semantics/publishedVersion


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