Estandarización de la Técnica de PCR en Tiempo Real para la Identificación Molecular de la Bacteria Helicobacter pylori

Abstract

Helicobacter pylori es una bacteria que se estima está presente en la mitad de la población mundial y desde 1980 se ha ligado con diferentes patologías gástricas, incluido el cáncer gástrico. Dada su importancia, tanto a nivel clínico como ambiental, la IARC ha considerado que existe suficiente evidencia para clasificarla como un patógeno primario completo capaz de inducir procesos carcinogénicos en humanos. Por lo tanto estudios que permitan realizar su detección son de suma importancia. Debido a ello, en el presente trabajo se estandarizó la técnica de PCR en tiempo real para la detección del gen glmM de la bacteria, ajustando la temperatura de alineamiento y se optimizaron las concentraciones de primers y de sonda de hidrólisis, empleando el equipo LightCycler 480 II, utilizando el método de análisis de cuantificación absoluta por segunda derivada máxima. Se obtuvo que 52°C fue la mejor temperatura de alineamiento con una eficiencia de 1,963; asimismo se determinó que la concentración de óptima cada primer fue de 1μM, con una eficiencia de 1,962 y finalmente, para la sonda de hidrólisis,