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dc.contributor.advisorArce-Solano, Silvia; Rojas-Rojas, Lauraes
dc.contributor.authorSolís-Campos, Esteban
dc.date.accessioned2020-07-13T16:22:52Z
dc.date.available2020-07-13T16:22:52Z
dc.date.issued2017
dc.identifier.urihttp://hdl.handle.net/2238/11448
dc.descriptionTrabajo final de graduación (Bachillerato en Ingeniería en Biotecnología) Instituto Tecnológico de Costa Rica, Escuela de Biología, 2017.es
dc.description.abstractAnualmente, alrededor de 420 000 personas mueren a nivel mundial por consumir alimentos contaminados, lo cual repercute en la necesidad de desarrollar métodos de detección de microorganismos patógenos que sean rápidos, reproducibles y baratos. La espectroscopía Raman destaca como una técnica capaz de cumplir con estas características, por lo cual esta investigación buscó obtener espectros Raman del ADN genómico y proteínas de Salmonella enterica y Klebsiella pneumoniae, bacterias relacionadas con intoxicaciones por alimentos y propagación de enfermedades nosocomiales, respectivamente. Se utilizó la metodología SERS, donde se monitorearon dos agentes reductores (NaBH4 y citrato) y un estabilizante (citrato) para la síntesis de AgNPs. Alternativamente, se optimizó la extracción del ADN genómico y se realizaron diluciones hasta 1:64, las cuales fueron sometidas a SERS. Para el análisis de proteínas totales, se probaron los métodos de extracción con fenol saturado y TRIzol; y se evaluaron los extractos del mejor por medio de SERS. De esta manera, se eligió la síntesis de AgNPs reducidas con NaBH4 y estabilizadas con citrato, bajo la proporción molar 1:4:0,1 (AgNO3:NaBH4:citrato); con partículas esféricas de 65 nm de diámetro y λmáx en 387-391 nm. El ADN evidenció las señales típicas de las bases nitrogenadas, fosfato y desoxirribosa en SERS, cuyas concentraciones óptimas en la detección estuvieron entre los 34,4 ng/μL y 235,1 ng/μL. En cuanto a la extracción de proteínas, se seleccionó la extracción fenólica por evidenciar una pureza significativamente mayor (p>0,05). Se pudieron caracterizar más de diez señales características de los modos vibracionales de las proteínas por medio de SERS, a pesar de las bajas intensidades obtenidas.es
dc.language.isospaes
dc.publisherInstituto Tecnológico de Costa Ricaes
dc.subjectEvaluación de espectros Ramanes
dc.subjectADN Genómicoes
dc.subjectSalmonella entericaes
dc.subjectKlebsiella pneumoniaees
dc.subjectIntoxicación por alimentoses
dc.subjectPropagaciónes
dc.subjectCiencias médicases
dc.subjectSurface-enhanced Raman spectroscopy (SERS)es
dc.subjectAnálisis de proteínases
dc.subjectMicroorganismos patógenoses
dc.subjectRaman Spectroscopyes
dc.subjectGenomic DNAes
dc.subjectFood poisoninges
dc.subjectSpreades
dc.subjectMedical Scienceses
dc.subjectProtein analysises
dc.subjectPathogenic microorganismses
dc.titleEvaluación de espectros Raman del ADN genómico y perfil proteico de dos bacterias de importancia biomédica mediante la metodología SERSes
dc.typeinfo:eu-repo/semantics/bachelorThesises


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