Optimización de un protocolo de extracción de ADN de Plantago major dirigida a la tipificación molecular

Abstract

Plantago major L. (llantén mayor o común) es una planta medicinal que presenta diversas propiedades, entre ellas la desinfección y cicatrización de heridas, actividad antiinflamatoria y analgésica, debido a que posee una serie de sustancias bioactivas que tienen gran potencial en la fabricación de medicamentos, por lo que la utilización de la especie correcta es crucial. Una técnica que analiza el ADN de los individuos como la tipificación molecular, es más eficiente y confiable que los procedimientos convencionales de identificación. El objetivo de este trabajo es la optimización de un protocolo de extracción de ADN de P. major para obtener ADN de calidad, que permita una posterior tipificación molecular de esta especie. Se emplearon muestras secas y frescas para valorar seis protocolos de extracción. Las muestras de ADN obtenidas se evaluaron mediante espectrofotometría, electroforesis en geles de agarosa y la amplificación por PCR con iniciadores para RAPDs y para microsatélites específicos. Los mejores resultados se alcanzaron con un protocolo que utiliza un kit de extracción, el cual demostró generar ADN de calidad para ambos tipos de muestra y además que se obtiene ADN amplificable para RAPDs, como el OPA02.

Plantago major L. (greater or common plantain) is a medicinal plant that presents diverse properties, among them the disinfection and healing of wounds, antiinflammatory and analgesic activity, because it has a series of bioactive substances that have great potential in the medicine manufacture, reason why the use of the correct species is crucial. A technique that analyzes the DNA of the individuals as the molecular typification is more efficient and reliable than the conventional procedures of identification. The objective of this work is the optimization of a DNA extraction protocol of P. major to obtain quality DNA, that allows a later molecular typification of this one species. Dry and fresh samples were used to value six protocols of extraction. The obtained DNA samples were evaluated by means of spectrophotometry, electrophoresis in agarose gels and the amplification by PCR with primers for RAPDs and specific microsatellites. The best results were reached with a protocol that uses kit of extraction, which demonstrated to generate DNA of quality for both types of sample and in addition that obtains amplifyable DNA for RAPDs, like the OPA02.